您好,欢迎来到三六零分类信息网!老站,搜索引擎当天收录,欢迎发信息
免费发信息
三六零分类信息网 > 安庆分类信息网,免费分类信息发布

影响ELISA试剂盒实验的因素

2019/10/2 1:08:11发布164次查看

选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。  
标本收集与保存:  
避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;  
2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保存需放置-20℃下。  
请避免反复冻融。 
试剂使用中的准备工作及注意事项:  
试剂盒中会有提示,一般需要准备的有:  
洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。  
显色液(有a液和b液的),用前15分钟配制;  
标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存;有的是要现配制的;按照说明书操作;  
浓缩生物素结合的二抗和hrp:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);  
熟悉加样器的使用,在进行实验之前用水来练习加样的快速和准确;  
试验前标本需缓慢升温至室温,若标本为血清,冻结血清融解後,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清後再检测;  
加样时应将所加物加在elisa 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出;  
加样後及时放入孵箱;  
加酶试剂後用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干;  
如果采用at或其他全自动加样,zui好选择fame或其他後处理仪器加酶试剂;  
标本较多时,请分批操作。每次加样zui好在两到三分钟内完成。加标本时zui好三排一加。每次加完样进行计时;  
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本od值大于标准品孔*孔的od值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物请避光保存。
严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
本试剂不同批号组分不得混用。
温 育:  
不好的操作原因:  
温育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;  
温育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。  
解决办法:  
贴封片或加盖:为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜复盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。  
按说明步骤严格控制操作时间。  
建议采用空气浴进行温育。  
参考elisa实验操作中的温育(incubation) 
洗 板:  
结果不好的可能原因  
采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。  
采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导  致洗板效果差。  
反应板过多造成洗板等待时间长。  
在间接法中如本底较高。  
在elisa 操作中,洗涤是zui主要的关键技术,操作时尤为注意:  
保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板後zui好在吸水纸或毛巾(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干(若使用易掉渣的纸,纸屑会留在板孔中,由于纸屑中含有氧化剂而造成高值阴性。);
严谨的设计,的试剂,正确的操作和良好的仪器是保证elisa必要条件。在实际操作中必须严格遵照规定操作,以严谨的作风检测每一份标本,才能保证试验效果。 
本公司专业代理多种品牌进口原装、分装“elisa试剂盒”。本公司作为酶联免疫供应商,凭借的技术的售前,售中,售后免费代测服务,共同铸就高品质的产品。多年专业酶免服务,质量保证,可免费提供代测服务,一周内出结果。欢迎咨询订购。

通蔚试剂(上海)有限公司
安庆分类信息网,免费分类信息发布

VIP推荐

免费发布信息,免费发布B2B信息网站平台 - 三六零分类信息网 沪ICP备09012988号-2
企业名录